第一章：實時熒光定量 PCR 總述

一、實時熒光定量 PCR 的概念

實時熒光定量 PCR 即 Real-time PCR，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個 PCR 進程，最后通過C_T 值和標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進行定量分析的方法。

二、實時熒光定量 PCR 的原理

A 化學(xué)原理

變產(chǎn)物DNA分子為熒光信號，通過測定熒光值即可反映產(chǎn)物 DNA分子量。

B 數(shù)學(xué)原理

通過循環(huán)數(shù)“n"(C_T 值 ) 來計算起始 DNA 量。

三、實時熒光定量 PCR 方法的選擇

四、實時熒光定量 PCR 的優(yōu)勢

比較不同樣品間某基因的“量"的方法：

實時熒光定量PCR的優(yōu)點：

(1)能夠?qū)崟r監(jiān)測PCR反應(yīng)的進程；

(2)具有更大的檢測范圍，能夠?qū)颖局械钠鹗剂窟M行準(zhǔn)確定量；

(3)在單管中同時實現(xiàn)擴增和檢測，無需PCR后處理。

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