一、試劑盒的應(yīng)用種屬、檢測樣本的種類

一般來說，生產(chǎn)廠家都會在產(chǎn)品名稱上標(biāo)明種屬，ELISA試劑盒種屬:人、小鼠、大鼠、兔、猴等。待檢樣本種類：體液、血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液、組織勻漿等。

二、試劑盒的檢測范圍

就是標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍，特別要注意待測樣本濃度是否落在標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍內(nèi)，對于高濃度樣本，需要先進(jìn)行預(yù)實驗摸索到比較好的稀釋倍數(shù)后再大量測定樣本。

三、特異性

就是陰性樣本的陰性檢出率，與試劑盒的關(guān)鍵組分—抗體對有關(guān)，確保抗體對雜質(zhì)無交叉反應(yīng)，交叉反應(yīng)越小，特異性越好。具體要求是試劑盒盡可能采用單抗，若抗體對中之一為多抗，另一個必須為單抗。

四、靈敏度

靈敏度簡單來說就是陽性樣本的陽性檢出率，反映的是試劑盒對于被檢物質(zhì)的低檢測能力。如果待測樣本濃度很低，則需選擇高敏的ELISA試劑盒。

五、精密性

又稱重復(fù)性，是對同一樣品重復(fù)測定時誤差大小的評估參數(shù)?？茖W(xué)實驗講求重復(fù)性，一般而言，ELISA試劑盒，其板內(nèi)和板間變異系數(shù)，國產(chǎn)試劑的變異系數(shù)在20％內(nèi)，進(jìn)口試劑在15％內(nèi)。

六、回收率

將已知的低、中、高濃度的標(biāo)準(zhǔn)品摻入到待測樣本中，摻入前后測到的濃度增加部分與摻入濃度之比就是回收率，以此驗證檢測的準(zhǔn)確度。ELISA試劑盒回收率通常在80-120%之間。

七、稀釋線性

認(rèn)的實驗線性：樣本稀釋后，最終分析物濃度應(yīng)該相同。在天然樣本基質(zhì)中添加有適當(dāng)濃度的標(biāo)準(zhǔn)品，分別稀釋不同倍數(shù)，測定各濃度下的回收率，線性通常介于80-120%之間。

八、穩(wěn)定性

穩(wěn)定性是試劑盒必需的基本屬性，是指試劑盒在有效期內(nèi)和規(guī)定條件下保持其性能的能力，一般有效期穩(wěn)定性、運輸穩(wěn)定性以及凍融穩(wěn)定性。一般以加速破壞性實驗進(jìn)行驗證，將未拆封的試劑盒在37°C和2-8°C分別放置一定時間，考察各項性能指標(biāo)的偏差，以偏差小于10%為合格。穩(wěn)定性越好，試劑盒存儲時間越長。

九、簡便性

試劑盒在保證高質(zhì)量數(shù)據(jù)的情況下，實驗時間越短，操作越便利越好。

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