AcceGen是一家美國生物技術(shù)公司。成立于2016年，位于新澤西州費爾菲爾德，AcceGen提供完整和精確的細胞產(chǎn)品和科研服務(wù)。AcceGen為客戶開發(fā)了專有的原代細胞永生化服務(wù)科研服務(wù)。

Caco-2 (人結(jié)直腸腺癌細胞)分離自一位72歲男性直腸原位癌，人結(jié)腸癌Caco-2細胞系在標準培養(yǎng)條件下匯合后，自發(fā)分化為腸上皮樣細胞，是常用的腸癌細胞模型。Caco-2細胞分離自直腸原位癌；當長到滿時，Caco-2細胞表現(xiàn)出特征性的腸上皮細胞分化。Caco-2細胞表達維甲酸結(jié)合蛋白I和維甲酸結(jié)合蛋白Ⅱ，并呈角質(zhì)蛋白陽性。下面讓我們一起來看看AcceGen人結(jié)直腸腺癌細胞Caco-2細胞的培養(yǎng)要點吧！

1. 細胞不貼壁怎么辦

Caco-2細胞培養(yǎng)基里添加的胎牛血清比例為20%，當血清比例降低，貼壁性下降時，補充胎牛血清至20%，繼續(xù)培養(yǎng)1-2天，細胞即可貼壁。檢查培養(yǎng)基是否偏堿（呈紫紅色），偏堿的培養(yǎng)基可能導致細胞無法貼壁。

2. 能否用DMEM替代MEM

可以。DMEM（Dulbecco's Modified Eagle Medium）是在MEM培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上研制的。Caco-2細胞在DMEM+20%FBS+1%P/S條件下生長狀態(tài)正常。

3. MEM中不含NEAA會怎樣

當使用不含NEAA的MEM培養(yǎng)基時，Caco-2生長速度可能下降，漂浮細胞增多。

4. 細胞消化不下來怎么辦

如果消化5-10分鐘，細胞部分脫落，另一部分仍然貼壁緊密，可以將脫落細胞轉(zhuǎn)移至離心管，向原瓶中加入新的胰酶，放入培養(yǎng)箱繼續(xù)消化剩余細胞，每隔1min拿出來觀察，直到細胞滑落。

5. 漂浮細胞多怎么辦

有少量發(fā)亮的細胞漂浮或黏附在細胞克隆上，是正常的，隨后會進入克隆并正常生長。所以避免頻繁觀察細胞，可以減少漂浮細胞產(chǎn)生。

如果Caco-2細胞隨著培養(yǎng)過程，漂浮得越來越嚴重，甚至大塊兒飄起，就要檢查培養(yǎng)基成分、培養(yǎng)環(huán)境是否出現(xiàn)異常了。

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